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胎牛血清的保存及使用注意事項說明
點擊次數:1467 更新時間:2022-01-12
胎牛血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。
血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
胎牛血清保存及使用注意事項:
1、保存溫度
血清一般保存在-20℃以下保存,使用之前應放置2-8℃冰箱過夜溶解。使用建議1周-2周內用完,如用量小建議小包裝分裝凍存,以免反復凍融,血清失效。
2、是否要滅活
熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已*解凍血清。加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理之目的是使血清中補體成份(complement)去活化。除非必須,一般不建議作此熱處理,因為會造成沈淀物之顯著增多,且會影響血清之品質。
3、為何會有沉淀
凝絮物:發生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中脂蛋白(lipoprotein)變性及解凍后胎牛血清中存在血纖維蛋白(fibrin)造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質。
若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜,并且會導致營養流失,細胞狀態不好。